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手把手教你如何用擬南芥培養(yǎng)箱培養(yǎng)擬南芥
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更新時間:2021-10-26
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擬南芥作為高等植物的模式生物被世界的植物生物學實驗室廣泛研究。擬南芥培養(yǎng)箱可用于基因表達、器官發(fā)育、基因突變等研究。然而,怎么培養(yǎng)好這種小植物可能不是那么容易。
擬南芥培養(yǎng)箱培養(yǎng)擬南芥步驟:
1、首先把擬南芥種子放到濾紙上,用70%酒精進行消毒處理,再用*進行處理(也可選擇20%漂白劑以及0.05%TritonX-100非離子表面活性劑做殺菌處理20分鐘)。用無菌水沖洗5遍,然后將種子點到MS培養(yǎng)基上,pH5.9,另加0.9%瓊脂以及2%蔗糖。
2、把種子放到冷光源培養(yǎng)箱中,設置4℃黑暗條件下進行春化48h-72h左右,在長日照或短日照條件下催芽。利用PLC控制器,編輯簡單的晝夜模式,設定光照時間16小時(黑暗8小時)或者光照14小時(黑暗10小時);選配Q23+連續(xù)光強調節(jié)裝置,設定光照強度為100-150umol/m2.s;設定室內溫度為光照條件下20-22℃,黑暗條件下18-20℃;選配濕度控制系統(tǒng),設定室內相對濕度70%。
3、出苗大約7~10天,然后移入土中培養(yǎng),采用底部灌溉方式澆水(利用土壤的毛細作用)。在澆水前,可使土壤*干燥,以后每隔7~10天澆一次水。
4、土壤可用營養(yǎng)土、蛭石以及珍珠巖比例10:1:1的比例配置,也可直接用堆肥、蛭石以及草炭等進行混合。在生長過程中,可用普通的花肥施肥一次或者不施肥。
5、當植株長到一定高度時,可剪斷莖桿,以產生更多的花序,可用于轉化研究或者獲得更多的種子
擬南芥培養(yǎng)箱特殊培養(yǎng):
為了加快擬南芥生長速度,在移入土壤培養(yǎng)后,可設定長日照,利用PLC控制器,編輯程序設定24h光照,光強100-250umol/m2.s,溫度持續(xù)22-23℃。
擬南芥根系處理培養(yǎng),可減少光照時間為8-12h,提高光照強度為100-350umol/m2.s,溫度為光照條件下22-23℃,黑暗條件下18-20℃,其余培養(yǎng)條件同正常培養(yǎng)。