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二氧化碳培養(yǎng)箱的使用要點及注意事項
 
  二氧化碳培養(yǎng)箱是醫(yī)院實驗室普遍使用的常規(guī)儀器之一。二氧化碳培養(yǎng)箱能在箱體內(nèi)模擬形成一個細胞、組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境。箱內(nèi)具有恒定的酸堿度(pH值:7.27.4)、穩(wěn)定的溫度(37℃)、較高的相對濕度(95%)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)。本文介紹了二氧化碳培養(yǎng)箱的正確使用方法和注意要點。
 

 

  一定要做好使用前的準備工作:
 
  二氧化碳培養(yǎng)箱應由專人負責使用,操作盤上的任何開關和調(diào)節(jié)旋鈕一旦固定后,不要隨意扭動,以免影響箱內(nèi)溫度,二氧化碳濃度、濕度的波動,同時降低機器的靈敏度。箱子的放置要水平,避免陽光直射和灰塵等,要保證儀器周圍的氣流循環(huán),后部及側(cè)面應留出5cm的空隙。加裝穩(wěn)壓電源保證電源電壓波動不超過220V+10%。所加入的水必須是蒸餾水或無離子水,防止礦物質(zhì)儲積在水箱內(nèi)產(chǎn)生腐蝕作用,經(jīng)常檢查箱內(nèi)水是否足夠,水位應加至“水位指示燈”滅燈時為止。使用前箱內(nèi)應用消毒酒精或碘溶液*擦洗,防止其他微生物污染,導致實驗失敗。在房間安裝空調(diào),使環(huán)境溫度保持在25度左右。所使用的二氧化碳必須是純凈的,否則降低二氧化碳傳感器的靈敏度和污染二氧化碳過濾裝置。
 
  正確充氣延長二氧化碳傳感器使用壽命:
 
  二氧化碳培養(yǎng)箱箱內(nèi)氣壓由二氧化碳氣體傳感器控制。二氧化碳傳感器正常反饋要求進氣壓為0.06MPa。當箱內(nèi)氣壓降低時,二氧化碳傳感器在低壓刺激下有節(jié)奏地開閉,向箱內(nèi)慢慢充氣,當進氣壓達0.1MPa時,自動停止調(diào)節(jié)。如充氣方法不當,使進氣壓力增大,當超過0.1MPa甚至0.2MPa壓力,會損傷二氧化碳傳感器。開始這種損傷效應不明顯,不易察覺,反復錯誤操作,二氧化碳傳感器損傷累積最終致命損壞,使氣壓調(diào)節(jié)失靈。因此,二氧化碳傳感器壽命與二氧化碳進氣壓大小有關,只要做好進氣壓調(diào)節(jié),就能保護二氧化碳傳感器性能。二氧化碳傳感器價格昂貴,更換不易,所以一定要做好進氣壓調(diào)節(jié),延長二氧化碳傳感器使用壽命。
 
  做培養(yǎng)時注意培養(yǎng)箱濕度:
 
  箱內(nèi)濕度對于培養(yǎng)工作來說是一項非常重要然而又經(jīng)常被忽略的因素。因為飽和濕度環(huán)境可以避免培養(yǎng)液中二氧化碳逃逸,培養(yǎng)液中ph值穩(wěn)定,有利用細胞生長,足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復速度(如在開關門后)才能保證不會由于過度干燥而導致培養(yǎng)失敗。所以二氧化碳培養(yǎng)箱使用過程中,在箱內(nèi)托盤中放一定量的滅菌水(3/2至全盤),使箱內(nèi)成為飽和濕度環(huán)境如使用者忘記不加水,使培養(yǎng)細胞處于低濕度甚至干熱環(huán)境中,培養(yǎng)液二氧化碳氣體易揮發(fā),液體PH值升高,影響細胞生長,在工作中要力求避免此問題發(fā)生。樣本多時,箱內(nèi)分區(qū)存放,培養(yǎng)物用筐或瓷盤存放,這樣存取快速,縮短開門時間,減少箱內(nèi)氣體和濕度變化,節(jié)省氣體,穩(wěn)定了細胞生長環(huán)境。
 
  防止二氧化碳培養(yǎng)箱污染做好箱內(nèi)消毒:
 
  二氧化碳培養(yǎng)箱污染是導致細胞培養(yǎng)失敗的一個主要因素,所以要減少和防止污染的發(fā)生,主要途徑是盡量減少微生物可以生長的區(qū)域和表面,采取消毒措施。例如,針對箱內(nèi)濕熱環(huán)境易滋生細菌等問題,我們采用在1000ml水中加2ml新潔而滅液,定期用酒精和紫外線消毒箱內(nèi)空氣,培養(yǎng)物酒精擦拭入箱內(nèi),盤里的水至少要一周換一次,控制污染,可以維持適應的蒸發(fā)作用,減少箱內(nèi)微生物滋生速度。為了培養(yǎng)箱免受污染并且保證儀器箱體內(nèi)的生物清潔性,有些二氧化碳培養(yǎng)箱設計了自動排除污染裝置來有效防止污染的產(chǎn)生。目前有多種消毒滅菌方式,如帶有紫外消毒功能CO2培養(yǎng)箱。還有的設計生產(chǎn)了HEPA過濾器能過濾培養(yǎng)箱內(nèi)空氣,可過濾除去99.97%的0.3um以上的顆粒,此外,還有設計了能使箱內(nèi)達到高溫濕熱的環(huán)境從而殺死污染微生物,達到消毒滅菌目的培養(yǎng)箱。